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瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)之凝膠制作與點(diǎn)樣
一、瓊脂糖凝膠制作1、瓊脂糖凝膠濃度配制凝膠的濃度據(jù)實(shí)驗(yàn)需要而變,一般在0.8%~2.0%之間,如果一次配制凝膠100ml,沒用完的凝膠可以再次融化,但隨著融化次數(shù)的增加,水分丟失也越多,凝膠濃度則會(huì)越來越高,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定,補(bǔ)水辦法:一是在容器上標(biāo)記煮膠前的刻度,煮膠后補(bǔ)充相應(yīng)的水分至原刻度;二是在煮膠前稱重,煮膠后補(bǔ)充水至原重量。粗略一點(diǎn)的方法是通過多次較恒定的煮膠條件得出一個(gè)經(jīng)驗(yàn)補(bǔ)水值。以保證凝膠濃度基本維持在原濃度。核酸染色劑溴化乙錠(ethidiumbromid...
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2014-12-10
脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染細(xì)胞實(shí)驗(yàn)材料及操作步驟
一、脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染細(xì)胞實(shí)驗(yàn)材料:1、Vero細(xì)胞2、轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒3、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液:無血清DMEM、10%血清DMEM4、脂質(zhì)體20005、6孔細(xì)胞培養(yǎng)板二、脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作步驟:(以6孔板為例予以說明)1、細(xì)胞鋪板:轉(zhuǎn)染前一天進(jìn)行鋪板,第二天待細(xì)胞長成單層即可進(jìn)行轉(zhuǎn)染。(Vero細(xì)胞按一傳三的比例進(jìn)行傳代,一般10~12h即可。)2、溶液1:240ul無血清DMEM+10ullipofectamine2000perwell(總體積250ul)(溫育5mi...
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2014-12-05
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